蝴蝶兰克隆苗工厂化育苗技术
技术名称:蝴蝶兰克隆苗工厂化育苗技术
技术概述:蝴蝶兰克隆苗工厂化育苗技术利用蝴蝶兰的花梗作外植体,直接诱导腋芽萌动,然后用所获得的无菌营养芽作为继代增殖材料,不经过原球茎而直接获得不定芽,再诱导生根成苗的试管繁育技术。该技术因为不经过愈伤组织过程,因此可以很好地保持母本的优良特性,变异率低,另外还具有周期短,繁殖系数较大,芽生长一致等特性。解决了外植体消毒处理、初代培养的褐化、培养基配方筛选等相关的技术关键。同时,项目研制出一套较完善的蝴蝶兰克隆苗规模化、标准化、工厂化生产工艺流程,该项技术的推广和应用对引导和促进我国兰花产业的发展具有重要意义。该项技术经专家鉴定为国内领先水平,获2007年广西科技进步三等奖。蝴蝶兰高海拔催花技术作为主要附属技术,蝴蝶兰营养生长温度为25-30℃,而生殖生长则需18-25℃,并且昼夜温差达5-10℃,在此条件下,蝴蝶兰由营养生长转向生殖生长,开始形成花芽。将具4-6片叶、生长健壮的植株,在计划产花期前4-5个月,运送到海拔700米以上的高山上进行催花,诱导花芽形成和生殖生长,当花芽长至15厘米以上,再移至山下温室栽培至开花,在整个过程中温度、湿度、光照、水肥的条件的调控是关键,另一重点是不同品种、苗龄、长势需要不同的上山时间和催花过程的长短,这对花期的调控和开花品质影响很大。该项技术经专家鉴定为国内领先水平(成果登记号:201091380),获2011年度南宁市科技进步二等奖。
增产增效情况:技术以种苗繁育和高山催花技术为主,自技术应用以来极大地加快了蝴蝶兰的种苗繁育及开花速度,缩短了繁育周期。利用该技术进行成果转化后,以年生产瓶苗200万株,盆花生产15万株估算,以目前的市场价格估算,年增产值达441万元,年增利税101万元。这对广西蝴蝶兰产业的发展起到一定的带动和促进作用,同时也为调整农业结构、提高农业区域经济效益作出一定的示范作用。
技术要点
(1) 芽繁芽克隆苗繁育技术
其基本原理是利用蝴蝶兰的花梗作外植体,诱导花梗腋芽萌动,然后用所获得的无菌营养芽作为继代增殖材料,不经过原球茎而直接获得不定芽,再诱导生根成苗的试管繁殖育苗技术。该技术因为不经过脱分化、愈伤组织再分化过程,因此可以很好地保持母本的优良特性,变异率低,另外还具有周期短,繁殖系数较大,芽生长一致等特性。
(2) 外植体消毒处理技术
外植体消毒处理技术是决定植物无菌离体培养成功与否的关键。许多植物就是因为外植体消毒不过关,无法进行下一步的诱导培养,从而导致整个培养过程的失败。因此这是试管离体培养能否成功的第一步。我们经过多次的试验摸索,得出了蝴蝶兰离体培养外植体的二次消毒法,包括不同外植体的预处理方法、消毒剂的选择、消毒程序方法和消毒时间的控制等方面。以尽量不伤害外植体又可以确保最低的污染率为原则,使用该消毒处理技术可使蝴蝶兰花梗外植体初次培养成功率达95%以上。
(3)抗褐化技术
褐化是蝴蝶兰离体培养中常见的现象,尤其是在前期的培养中,褐化会影响植物离体培养的正常进行,包括芽的萌发和增殖效果,严重时会导致材料的死亡。我们通过在诱导和增殖培养基中附加不同的抗褐化剂,如:维生素C、PVP 、活性炭、柠檬酸等,另一方面,对培养条件特别是光照条件进行对照试验,对植物本身的因素也进行了跟踪观察。结果表明:最佳的处理是附加PVP并采用暗培方式,既在一定程度上抑制了褐化同时也获得较好的芽萌发和增殖效果。另外,褐化与植物本身的内在因素也有关系,不同的植物种类不同的品种褐化程度有所区别。对于大规模商品化生产,为提高效率,降低成本,品种品系也应该作为考虑因素之一。
(4)各阶段培养基配方的优化和筛选
通过培养基组成成分中的大量元素、微量元素、有机物、水果类、碳源、植物生长调节剂等种类、浓度的筛选,研究出花梗诱导培养基、丛芽增殖培养基、壮苗生根培养基等商品化生产系列优化配方,提高诱导成功率和增殖倍数,保证有效芽质量,同时尽量减低生产成本。
该项研究摸索出一套较完善的蝴蝶兰克隆苗工厂化生产的工艺流程和标准化大规模育苗生产管理模式,建立了广西首家大规模蝴蝶兰组培快繁育苗工厂,获得了以下性能指标:花梗腋芽诱导成功率90-95%,外植体初代污染率10%以下,增殖倍数3-7倍,继代污染率3%以下,生根率100%;变异率1%以下。
经广西壮族自治区科技厅组织专家鉴定:从该项目获得的性能指标、技术路线、工艺流程、管理模式、生产规模和效率等方面来看,项目达到国内同类研究领先水平(已获自治区科技成果登记:200776069),该技术已达到大规模商品化生产要求,可以进行生产示范和推广应用。
(5)蝴蝶兰高山催花技术
蝴蝶兰营养生长温度为25-30℃,而生殖生长则需18-25℃,并且昼夜温差达5-10℃,在此条件下,蝴蝶兰由营养生长转向生殖生长,开始形成花芽。将具4-6片叶、生长健壮的植株,在计划产花期前4-5个月,运送到海拔700米以上的高山上进行催花,诱导花芽形成和生殖生长,当花芽长至15厘米以上,再移至山下温室栽培至开花,在整个过程中温度、湿度、光照、水肥的条件的调控是关键,另一重点是不同品种、苗龄、长势需要不同的上山时间和催花过程的长短,这对花期的调控和开花品质影响很大。该项技术经专家鉴定为国内领先水平(成果登记号:201091380),获2011年度南宁市科技进步二等奖。
适宜区域:该技术中的克隆苗工厂化繁育技术为组培快繁技术,具有广谱性。高山催花技术需要昼夜温差达5-10℃才可以实现。
注意事项:外植体消毒处理技术是决定植物无菌离体培养成功与否的关键,该技术中的蝴蝶兰离体培养外植体二次消毒技术,要特别注意不同外植体的预处理方法、消毒剂的选择、消毒程序方法和消毒时间的控制等方面。高山催花技术需要高海拔条件,昼夜温差达5-10℃,选择适合的高山条件是关键。